Técnica de hibridación FISH para la detección de
neoplasias mieloides
La Hibridación In Situ Fluorescente (FISH)
ha probado ser eficaz para la detección de neoplasias mieloides ya que se trata
de una técnica que utiliza sondas de ADN específicas y detecta fusiones de
genes como PDGFRA, PDGFRB, FGFR1, PCM1-JAK2. Primero se toma la muestra de
sangre periférica, luego se realiza un cultivo de 1-2 días con forbol
12-miristato 13-acetato y se añade colchicina, para evitar la formación del
huso mitótico, después se añade solución salina para lisis celular, los
cromosomas se pintarán con fluorocromo permitiendo analizar el genoma completo
e identificar clones independientes.
1. Rack KA, van den Berg E, Haferlach C, Beverloo HB, Costa D, Espinet B, et al. European recommendations and quality assurance for cytogenomic analysis of haematological neoplasms. Leukemia [Internet]. 2020;33(8):1851–67. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1038/s41375-019-0378-z
domingo, 8 de junio de 2025
Técnica de PCR para Hepatitis B
La hepatitis B es una enfermedad que afecta al hígado, causada por el
virus de la hepatitis B (VHB), que se transmite a través de sangre, fluidos
corporales como semen y líquidos vaginales, o de la madre al bebé durante el
parto. Para detectar y analizar este virus, se utiliza la técnica de PCR, que
permite identificar el ADN del VHB, medir su cantidad en el organismo y
detectar posibles mutaciones a partir de una muestra de sangre del paciente. Esta
técnica evalúa principalmente los genes S (de superficie) y C (Core), que
confirman la presencia del virus, además de analizar el gen P (Polimerasa) y,
en algunos casos, el gen X.
Tipo de muestra biológica: Suero, plasma, sangre
y fluido oral.
Tipo de ácido nucleico: ADN viral
Extracción (lisis,
separación, purificación):
Lisis: Aplicación de agentes químicos como detergentes o
proteinasas, o métodos físicos como calor o ultrasonido para romper las
membranas celulares y liberar el ADN.
Separación: Utilización de la centrifugación para remover los
detritos celulares y otras macromoléculas.
Purificación: Precipitación del ADN viral utilizando alcoholes
como etanol o isopropanol para eliminar impurezas.
Tipo de PCR: A tiempo real (RT-PCR), entre 30 y 40 ciclos,
dependiendo del equipo.
Genes amplificados
Gen S (Superficie)
Gen C (Core)
Gen P (Polimerasa)
Gen X
Pasos de
amplificación:
Desnaturalización: 94°C por 20 segundos - Separar las hebras
de ADN.
Hibridación: 50°C por 20 segundos - Primeros se unan a las
secuencias diana del ADN.
Elongación: 72°C durante 30 segundos para que la ADN polimerasa
extienda las hebras a partir de los primeros.
La técnica de PCR en tiempo real (RT-PCR) descrita
para la detección del virus de la hepatitis B (VHB) proporciona resultados
cuantitativos. Esto se debe a que este método permite medir la cantidad de
ADN viral presente en la muestra mediante el uso de curvas estándar y valores
de fluorescencia en tiempo real, lo que facilita la determinación de la carga
viral.
1. Guvenir M,
Arikan A. Hepatitis B virus: From diagnosis to treatment. Pol
J Microbiol [Internet]. 2020;69(4):391–9. Disponible en:
http://dx.doi.org/10.33073/pjm-2020-044
domingo, 1 de junio de 2025
Técnica de secuenciación para fibrosis quística
En el estudio de la fibrosis quística, la secuenciación del ADN se ha convertido en una herramienta fundamental para identificar variantes genéticas en el gen CFTR. Inicialmente, se emplean ensayos de PCR en tiempo real y análisis de disociación de alta resolución (qPCR-HRM) para detectar posibles alteraciones en las regiones codificantes adyacentes del gen. Posteriormente, la secuenciación permite identificar con precisión las variantes presentes, lo que facilita la clasificación de estas como patogénicas. Esta metodología contribuye a diagnósticos más completos y precisos. Gracias a estos avances, es posible orientar mejor las terapias personalizadas y mejorar la calidad de vida de los pacientes con fibrosis quística.
La esquizofrenia es un trastorno psiquiátrico grave con una compleja gama de signos y síntomas, se sabe que los mi-ARN juegan un papel crucial en el desarrollo del SNC, mediante estudios de asociación de genoma completo en pacientes postmortem con esquizofrenia, se descubrió que en la circunvolución temporal superior existe una regulación a la baja de genes miR-181b y al receptor de glutamato GRIA2 al estar implicado con la plasticidad sináptica. Los genes diana, como RELN, DRD1, VSNL1, HTR2A con función en la conectividad neuronal, se asocian al desarrollo de la enfermedad.
Khavari B, Cairns MJ. Epigenomic dysregulation in schizophrenia: In search of disease etiology and biomarkers. Cells [Internet]. 2020;9(8):1837. Disponible en: http://dx.doi.org/10.3390/cells9081837
Evidencia bibliográfica PubMed
sábado, 17 de mayo de 2025
Alteraciones de la traducción de Diabetes Mellitus tipo I (DMT1)
La DMT1 es uno de los trastornos metabólicos más
complejos caracterizado por la destrucción de células β del
páncreas, diversos estudios han descubierto que los miARN se unen a la
secuencia especifica del extremo de la región no traducida 3' (UTR) para así
formar el complejo miRISC, una unidad que contiene una proteína Argonauta capaz
de facilitar la interacción entre los miARN y su diana, dependiendo del grado
de complementariedad en la interacción miARN-diana, un mayor grado puede
degradar al ARNm, mientras que un menor grado obstruye la traducción para la
síntesis de proteínas.
1. Margaritis K, Margioula-Siarkou G, Giza S, Kotanidou EP, Tsinopoulou VR,
Christoforidis A, et al. Micro-RNA implications in type-1 diabetes
mellitus: A review of literature. Int J Mol Sci [Internet]. 2021;22(22):12165.
Disponible en: http://dx.doi.org/10.3390/ijms222212165
Evidencia bibliográfica
domingo, 11 de mayo de 2025
Alteraciones de la transcripción del cáncer de mama
Las alteraciones anormales en las histonas (HM) y los factores de transcripción (TF) pueden modificar la expresión de genes y favorecer el cáncer de mama. Un estudio comparativo entre células de cáncer de mama (MCF-7) y células epiteliales mamarias normales (HMEC) evaluó el efecto de 11 HM y 2 TF en la expresión de genes relacionados con el cáncer. Mediante el uso de Random Forest, se identificó el genH3K79me2, el cual se consideró clave en la regulación génica, indicando su papel central en el cáncer de mama.
Jin W, Li Q-Z, Liu Y, Zuo Y-C. Effect of the key histone modifications on the expression of genes related to breast cancer. Genomics [Internet]. 2020;112(1):853–8. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.ygeno.2019.05.026
Evidencia bibliográfica
domingo, 4 de mayo de 2025
Distrofia muscular de Duchenne
Es causada por una ausencia
de la distrofinadebido a una mutación en el gen que codifica
la distrofina (DMD), la DMD se localiza en el cromosoma X (Xp21.2) es
por ello que la enfermedad afecta con más frecuencia a varones que a mujeres. En ultima estancia, la DMD conduce a la muerte
prematura a los 20 o 30 años por la pérdida progresiva de masa muscular esquelética
junto a su función, a pesar de ser común, hay subdiágnosticos que dan esperanza de vida.
Rugowska A, Starosta A, Konieczny P. Epigenetic modifications in muscle regeneration and progression of Duchenne muscular dystrophy. Clin Epigenetics [Internet]. 2021;13(1):13. Disponible en: https://doi.org/10.1186/s13148-021-01001-z
